天仙子急性毒性抗炎及镇痛作用职称论文

来源：职称驿站所属分类：预防医学论文
发布时间：2013-09-26浏览：40次

　　【摘要】目的：探讨天仙子提取物的急性毒性、抗炎及镇痛作用。方法：以最大浓度最大给药量用于小鼠，验证其急性毒性，测定最大耐受量(MTD);以小鼠热板法、小鼠扭体法观察其镇痛作用;以二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察其抗炎作用。结果：急性毒性试验测定小鼠对该药的最大耐受量(MTD)为200g·ml-1，相当于人日常用量的8333倍;实验数据经t检验统计，表明天仙子具有镇痛作用，也可以明显抑制炎症反应。结论：天仙子对小鼠的毒性很小，并且具有良好的镇痛、抗炎作用。

　　【关键词】天仙子急性毒性试验最大耐受量抗炎镇痛 医学期刊投稿专业解答

　　Researches in Acute Toxicity,Anti-in flammatory and Antalgic Effect of Seeds of Hyoscyamus lnger

　　天仙子(Semen Hyoscyami)为茄科植物莨菪Hyoscyamus niger L.的干燥成熟种子，原称“莨菪子”，又称“横唐”。味辛，性温，有大毒，为非常用中药，始见于《神农本草经》，归心、胃、肝经。具有解痉止痛，安神定喘之效，用于胃痉挛疼痛，喘咳，癫狂等症[1]。现代临床常用于抗癌制剂中，由于癌证患者多伴有疼痛症状，而且传统功效亦有止痛作用，故对其镇痛作用进行研究。又因其有定喘功效，呼吸系统疾病常伴有炎症发生，推断该药材应具有一定的抗炎作用，故本实验对其急性毒性和镇痛、抗炎的药理作用进行观察，为进一步研究开发该药材提供科学依据。

　　1 材料

　　1.1 药品和试剂天仙子药材于2007年3月购于安徽药材市场，经药典方法鉴定为正品。样品溶液的制备：将100g药材加8倍量水煎煮3次，每次0.5小时，合并滤液，浓缩到所需浓度。去痛片：锦州九泰药业有限责任公司产品，批号H21020013。头孢氨苄：沈阳奥吉娜药业有限公司产品，批号H21023727。冰醋酸(分析纯)：上海佘山化工厂，批号950710。二甲苯(分析纯)：武汉有机合成化工厂，批号940826。

　　1.2 实验动物昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，以上实验动物均由大连医科大学实验动物学部提供。

　　1.3 仪器 AT201型电子分析天平，上海精密科学仪器有限公司;GJ-8402型热板测痛仪(电压220V，功率150W，温度55±0.2℃)，浙江宁海白石电子医药仪器厂产品。

　　2 实验方法

　　2.1 急性毒性试验[2] 动物预试验结果表明无法测出半数致死量(LD50)。依据陈奇的《中药药理研究方法学》，对受试药物进行最大耐受量(MTD)的测定。取小鼠20只，雌雄各半，随机分为2组，每组10只。以天仙子最大浓度水煎液按0.4ml·10g-1一次性给小鼠灌胃后即对动物体重、精神状态、毛色、自主活动、呼吸、饮食、二便、口鼻分泌物等一般状况进行观察，连续观察7天并记录观察结果。

　　2.2 镇痛作用试验

　　2.2.1 热板法[2] 将预选合格的小鼠作正式实验，将热板测痛仪调节至55℃，将雌性小鼠置于热板上，以雌小鼠口舔后足为准，连续测量痛阈值3次，每两次间隔5分钟，取其平均值为基础痛阈，筛选基础痛阈在5～30s的雌小鼠50只，随机分为5组，每组10只，依次为生理盐水组、阳性对照组、天仙子水煎液低、中、高剂量组，分别灌胃等容量生理盐水，去痛片0.365g/(kg·d)和天仙子水煎液0.3g·(kg·d)-1、0.6g·(kg·d)-1、0.9g·(kg·d)-1，每日1次，连续7日，于末次给药后不同时间测定并记录各小鼠痛阈值，计算各组小鼠痛阈提高率。

　　痛阈提高率(%)=(给药后平均痛阈值-给药前平均痛阈值)/给药前平均痛阈值×100%

　　2.2.2 小鼠扭体法[2] 取雌鼠50只，分组及用药同2.1.1。末次给药后30分钟，分别给各组小鼠腹腔内注射新鲜配制的(0.5%)冰醋酸溶液0.2ml。以小鼠腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高为准，记录各组小鼠出现扭体反应的时间及15分钟内各鼠扭体次数。将给药组与生理盐水组作比较，并计算各药物组的扭体反应抑制率。

　　扭体反应抑制率(%)=(空白组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)÷空白组平均扭体次数×100%

　　2.3 抗炎作用试验

　　2.3.1 小鼠耳廓肿胀法[2、3] 取小鼠50只，雌雄不限，分组及用药同2.1.1。连续给药7天，每天1次，末次给药后30分钟，将0.03ml对二甲苯涂于各小鼠右耳两面致炎，致炎后1小时处死小鼠，以8mm打孔器在小鼠左右耳廓相同部位打下耳片，电子分析天平称重，左右耳片重量之差即为肿胀度。将给药组与生理盐水组作比较，并计算各药物组的耳廓肿胀抑制率。

　　耳廓肿胀抑制率(%)=(空白组耳廓肿胀度均值-给药组耳廓肿胀度均值)÷空白组耳廓肿胀度均值×100%

　　2.4 统计方法采用SPSS11.0软件将各试验组数据进行统计，试验数据用x±s表示。

　　3 结果

　　3.1 急性毒性实验结果动物在给药后均表现为活动明显减少，静卧不动，闭目，对刺激的反应性减弱，低头，呼吸稍慢，各组小鼠均出现以上不同程度的中毒表现。给药10h后恢复常态，开始进食。观察7天后仍无死亡，便以颈椎脱位法处死动物，并对所有动物进行肉眼尸检，亦未发现异常。小鼠口服天仙子水煎液最大耐受量是200g·kg-1，相当于临床用量的8333倍。

　　3.2 对小鼠不同痛反应的影响

　　3.2.1 对热板反应的影响阳性对照组、天仙子水煎液低、中、高剂量组各小鼠，给药后平均痛阈值均较给药前显著提高(P<0.05)，其痛阈提高率分别为46.85%、27.52%、32.50%、38.93%，且给药后各组与生理盐水组比较，痛阈值亦显著提高(P<0.05)，表明药物对热刺激致小鼠疼痛具有明显镇痛作用(见表1)。表1 各组对热板法致小鼠疼痛的影响(注：与给药前比较，△P<0.05，▲P<0.001。

　　3.2.2 对扭体反应的影响阳性对照组、天仙子水煎液低、中、高剂量各组小鼠，15min内扭体次数均较生理盐水组显著减少(P<0.05)，其扭体反应抑制率分别为34.25%、14.16%、23.74%、31.05%，表明药物对冰醋酸致小鼠腹痛具有明显镇痛作用(见表2)。表2 各组对冰醋酸致小鼠腹痛的影响注：与生理盐水组比较，△P<0.05，▲P<0.001。

　　3.3 对动物炎症反应的影响阳性对照组、天仙子水煎液低、中、高剂量各组小鼠，耳廓肿胀度均较生理盐水组明显减轻(P<0.01)，其肿胀抑制率分别为46.02%、17.72%、24.55%、38.21%，表明药物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀具有明显抑制作用，见表3。表3 各组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响注：与生理盐水组比较，△P<0.05，▲P<0.001。

　　4 讨论

　　以上药理试验表明，天仙子水煎液具有较明显的镇痛、抗炎作用，对不同的致痛、致炎模型显示了对抗作用，对其传统功效提供了一定的现代科学解释依据。同时亦观察到，其镇痛和抗炎作用均以高剂量为优，呈明显的量效关系。急性毒性试验表明，给小鼠灌胃后引起不同程度的急性毒性反应，但10h后毒性反应现象消失，说明该药对小鼠毒性较小。天仙子含阿托品0.06%～0.2%、莨菪碱0.02%～0.2%，东莨菪碱、莨菪胺0.01%～0.08%，阿托品的作用机制是竞争性拮抗Ach或拟胆碱对M胆碱受体的刺激作用，小剂量阿托品就能阻断Ach或拟胆碱药与M受体结合从而拮抗其作用，大剂量会造成毒性反应，而东莨菪碱中枢镇痛及抑制腺体分泌作用强于阿托品，其外周抗胆碱作用和阿托品相似。所以，天仙子含有的有效成分用量大便会产生毒性。本试验所采用的动物为啮齿类动物小白鼠，对天仙子药物毒性反应不够明显，其作用机制有待于进一步深入研究。

　　【参考文献】

　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版(一部)[S].北京：化学工业出版社，2005：37.

　　[2] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1993：305.

　　[3] 洪佳璇.消喘煎镇咳、平喘、抗炎作用的实验研究[J].中国中药杂志，2006，31(2)：169～172.

《天仙子急性毒性抗炎及镇痛作用职称论文》

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