浅谈灵芝孢子粉药理作用研究进展

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　灵芝又称“仙草”，是一种珍贵的药用真菌，属于担子菌纲，多孔菌科，灵芝属。《神农本草经》及《本草纲目》等古书记载，灵芝有“益心气”、“入心生血”、“助心充脉”、“安神”、“益肺气”、“益精气”、“坚筋骨”等功效，把灵芝列为上品。灵芝传统的药用部位仅限于其子实体，而灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来的淡雾状的极其微小的孢子，具有灵芝的全部遗传活性物质。近年来，随着人工栽培技术和孢子破壁技术的发展，以及灵芝孢子生物活性成分、药理作用、加工方法的研究逐步深入，使得灵芝孢子（粉）作为灵芝的又一药用部位逐渐为人们所认识，是20世纪80年代开发的新药源。因此，笔者综述了灵芝孢子粉的药理作用，以充分了解灵芝孢子研究现状，为灵芝孢子深入研究提供参考。
　　1灵芝孢子粉的药理作用
　　1.1免疫作用
　　仝国辉等研究表明1 800 mg ·kg-1BW剂量组灵芝孢子粉可提高免疫调节指标小鼠单核巨噬细胞的吞噬能力、脾脏抗体生成细胞数、血清中抗绵羊红细胞抗体效价、迟发型变态反应和NK细胞活性等，并表现出显着差异性，认为动物在饲用灵芝孢子粉后所表现出的高活性免疫能力可能与其含有的丰富的肽多糖和高含量的维生素E有关。巨噬细胞为机体免疫系统中重要的免疫细胞，活化的巨噬细胞吞噬功能显着增强，并可分泌多种生物活性物质(如 NO、IL21β及TNF 2α、活性氧等)，杀伤肿瘤细胞。如 TNF 2 α 对肿瘤细胞具有直接的细胞毒作用和生长抑制作用，IL21β也有免疫调节、抗微生物和抗肿瘤作用，NO对肿瘤细胞和微生物有很强的杀伤作用。唐庆九等研究结果显示经灵芝孢子粉碱提多糖刺激后，小鼠巨噬细胞变大，颜色加深，并能显着刺激巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β，并产生大量的NO；小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬功能也明显的增强。这表明，灵芝孢子粉碱提多糖对小鼠巨噬细胞具有明显的激活作用。然而，叶波平等利用凝胶层析法分离得到破壁灵芝孢子粉的蛋白成分LZP-2和LZP-3，通过小鼠脾淋巴细胞转化试验表明：灵芝孢子蛋白成分LZP-2和LZP-3体外具有较强的促进淋巴细胞增值的活性，并且呈现出一定的剂量依赖效应，SDS-PAGE测得它们的相对分子质量分别为67 000，43 000；并初步认为该蛋白可能是灵芝孢子中具有免疫调节活性的成分之一，具有潜在的临床应用价值。
　　灵芝孢子的免疫活性与破壁与否及破壁率大小有直接关系。朱继红等研究发现灵芝孢子粉可明显提高淋巴细胞转化率，增强小鼠腹腔巨噬细胞酸性磷酸酶（ACP酶）活性的能力，但活性大小与破壁率有关，在900 g·kg-1剂量下，高破壁率（95%）灵芝孢子粉能较早促进小鼠巨噬细胞ACP 酶活性作用，这可能与灵芝孢子粉内容物易于释放以及破壁孢子粉含有较高的还原糖和多肽有关。同时，灵芝孢子粉无论破壁还是未破壁，在给药后的第8天产生的药理活性最佳。结果提示，灵芝孢子粉可能主要通过作用免疫细胞增强其活性，从而直接或间接调节小鼠机体免疫功能。吴明忠等研究破壁灵芝( Ganoderma Lucidum) 孢子粉对小鼠免疫功能的影响，结果显示破壁灵芝孢子粉333.13～1 000 mg·kg-1BW 可增强2,4二硝基氟苯（DNFB），引起小鼠迟发性超敏反应和增强小鼠血清溶血素反应的作用，但相同剂量下碳廓清试验中，破壁灵芝孢子粉增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能不显着。根据《保健食品功能学评价程序和检验方法》的结果判定原则，认为破壁灵芝孢子粉具有免疫调节作用。而陈晓君等首次用萌动激活的赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL22 (白细胞介素22) 的分泌和脾淋巴细胞转化增殖的影响进行研究，结果显示，与对照组相比，萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL22 分泌有明显促进作用，并能明显提高小鼠脾淋巴细胞转化增殖，并有一定的量效关系，也表明萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠免疫功能有明显的促进作用。
　　1.2抑制肿瘤作用
　　灵芝孢子是目前国内作为肿瘤治疗的众多辅助用品之一。陆明等采用动物灌胃方法研究灵芝孢子对小鼠肉瘤-180（S-180）腹水型肿瘤的抑制作用，结果显示在瘤细胞数和瘤质量上，灵芝孢子的抑瘤率分别为35.93%和39.5 %。张馨等、杨星星等以S-180瘤细胞和H-22瘤细胞移植性肿瘤观察灵芝孢子粉的抗肿瘤效果，结果显示对S-180和H-22肿瘤细胞小鼠移植性肿瘤生长也有明显的抑制作用。陈雪华等[10]研究灵芝孢子粉对荷HAC肝癌小鼠T细胞表面分化抗原，体外细胞杀伤功能以及肿瘤抑瘤率的影响，结果显示灵芝孢子粉治疗组中总T细胞的百分率(63.4％)高于对照组(56.3％)，其中对总T细胞，T辅助的上调较为明显。
　　灵芝孢子的抑瘤因子尚不明确。尚德静等[11]初步探讨灵芝硒多糖 (SeGLP-1)的抗氧化作用与抗肿瘤作用的关系，表明SeGLP-1可通过提高机体抗氧化能力而抑制肿瘤的生长。然而也有报道称灵芝孢子抑制肿瘤细胞是通过多糖类成分提高宿主的免疫功能而发挥作用。
　　张馨等以小鼠骨髓细胞微核实验和睾丸染色体畸变试验观察灵芝孢子粉的抗突变作用，结果显示，灵芝孢子粉对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核发生和丝裂霉素诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变均有明显的抑制效果。杨星星等观察灵芝孢子粉对小鼠实验性突变的影响，结果显示以灵芝孢子粉(0.2~5.0 g·kg-1BW) 灌胃可明显降低环磷酰胺所致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率。这说明灵芝孢子粉对体细胞和生殖细胞的DNA损伤均有保护作用。
　　1.3保肝解毒作用
　　刘昕等[12]、张庆萍等[13]研究表明灵芝孢子粉以及萌动激活的破壁灵芝孢子粉对D-氨基半乳糖所致肝损伤都具有明显的保护作用。而灵芝孢子油（采用超临界二氧化碳流体萃取技术从破壁的灵芝孢子中萃取得到的油状脂质物）对四氯化碳（CCl4）所致的肝细胞损伤也显示出明显的保护作用；从赤灵芝孢子粉酯溶部分分离得到的赤灵芝孢子酸A可降低CCl4和D-氨基半乳糖引起的小鼠转氨酶升高，对丙酸杆菌引起的小鼠免疫性肝损伤也有保护作用；灵芝孢子粉溶于醚的部分对部分肝切除的小鼠具有一定的促进肝细胞再生的作用。灵芝孢子的保肝作用可能与化学成分中含有三萜有关。孙美芳等[14]研究灵芝孢子粉对抗癌药环磷酰胺毒副反应的拮抗作用，结果发现灵芝孢子粉可明显拮抗由环磷酰胺引起的机体耐力下降、血红蛋白降低、巨噬细胞吞噬功能减弱和急性肝功能损害等毒副作用，表明灵芝孢子粉对抗癌药环磷酰胺的毒副反应有一定拮抗作用。
　　1.4调节血脂、降低血糖作用
　　灵芝孢子粉的三萜类化合物和多糖含量比较丰富，而萜类物质和多糖均有一定的降脂作用。因此，张卫明等[15]研究结果显示在500 mg·kg-1BW（相当于人体推荐摄入量的 20 倍）的剂量时，灵芝孢子粉具有降低试验大鼠血清总胆固醇（TCHO）和甘油三酯（TG）的作用；而对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL - C) 无影响。根据调节血脂作用检验结果判断原则，表明在500 mg·kg-1BW的剂量时，赤灵芝孢子粉具有调节血脂作用。

　　灵芝孢子粉乙醇提取物的水溶部分( Glse)能拮抗正常小鼠因葡萄糖或肾上腺素引起的升血糖作用，改善糖尿病小鼠的葡萄糖耐量。梁荣能等[16]用链脲菌素（Stz）复制大鼠糖尿病模型观察了Glse的降糖作用及其对胰岛素离体生物活力和内分泌激素（Ins）、生长激素（GH）、皮质醇（Cor）的影响；试验结果显示Glse (相当生药6 250 mg·kg-1对糖尿病大鼠有明显的降低血糖作用，增强耐糖效应，对Stz 损伤有一定的对抗作用，促进糖尿病大鼠的Ins 分泌，维持GH、Cor 的正常水平。张灵华等[17]研究则表明GIse可能通过抑制糖元的分解，达到降血糖的目的。糖尿病患者多饮、多食症状十分突出，GIse还能减少糖尿病小鼠的饮水量。此作用可能有益于缓解病人的症状[13]。
　　1.5抗辐射作用
　　灵芝孢子粉具有明显地抗辐射损伤作用。颜燕等[18]研究灵芝孢子粉的抗辐射功能，以0.25，0.50，
　　1.50 g·kg-1BW剂量的灵芝孢子粉混悬液连续灌胃小鼠60 d，在第30 天以8.2 Gy 60Coγ- 射线照射小鼠，观察小鼠的白细胞总数、30 d存活率、平均存活时间，结果显示灵芝孢子粉能使辐照后小鼠30 d 存活率明显增高，平均存活时间延长，白细胞总数明显增加。仝国辉等研究认为灵芝孢子粉可显着延长受7.5 Gy 60Co -γ射线照射小鼠的平均存活时间，提高30 d 存活率和白细胞总数（WBC）。
　　1.6耐缺氧能力
　　随着市场经济的发展，社会生活节奏加快，竟争日益增强，如何加强人体素质，迅速消除疲劳，保持旺盛的精力已成为人们的需要。寻找开发天然、无毒副作用且能提高人体耐缺氧、抗疲劳的保健食品具有重要意义。赵春等[19]探讨灵芝孢子粉对小鼠耐缺氧能力的影响，结果显示，在亚硝酸钠中毒存活试验中，高剂组与对照组相比差异有显着性( P 0.05)；在急性脑缺血缺氧试验中，灵芝孢子粉低，中，高3个剂量组断头存活时间明显高于对照组( P 0.01) ，张口呼吸次数也明显高于对照组( P 0.01)；表明灵芝孢子粉对提高小鼠耐缺氧的能力有一定的作用。
　　1.7抑制急性胃溃疡形成
　　郭家松等[20]探讨灵芝孢子粉及灵芝孢子蜂胶在抑制急性胃溃疡形成方面的作用。通过无水酒精灌胃法制备急性胃溃疡小鼠模型，比较观察灵芝孢子粉组、灵芝孢子蜂胶组与对照组之间溃疡发生率、胃溃疡指数及胃黏膜形态的差异。结果发现，与对照组相比，灵芝孢子粉组及灵芝孢子蜂胶组的溃疡发生率和胃溃疡指数均显着降低，胃黏膜结构相对完整。表明灵芝孢子粉及灵芝孢子蜂胶能抑制急性胃溃疡的形成。
　　1.8 对神经系统的作用
　　朱蔚文等[21]研究灵芝孢子油对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）帕金森病（PD）小鼠模型行为学及病理改变的影响，了解灵芝孢子油能否减轻MPTP对中脑黑质多巴胺（DA）神经元的选择性损害，探讨灵芝孢子油治疗PD的可能性。结果显示，灵芝孢子油能明显改善MPTP小鼠模型行为学，增加纹状体DA及其代谢物含量，减少黑质DA能神经元的损伤，提示灵芝孢子油可能具有减缓PD病变进程的神经保护作用。
　　1.9抗病毒作用
　　灵芝孢子中含有至少两类抗病毒物质，一类是水溶性物质，另一类是甲醇溶性物质。水溶性物质显示特别的抑制单纯疱疹病毒HSV-1和HSV-2的活性。进一步研究表明，从灵芝孢子中得到的4种抗疱疹病毒物质是蛋白结合多糖，其中酸性蛋白结合多糖（APBP）显示了最强的抗疱疹病毒的活性。
　　1.10抗炎作用
　　刘虹等[22]报道，在注射灵芝孢子水溶成分（Glse）后立即于左耳涂2%巴豆油溶液0.05 mL，4 h后杀死小鼠，取两耳用直径8 mm圆冲冲出耳片，以左右耳片质量表示肿胀程度。结果表明，灵芝孢子粉制剂能抑制耳肿胀，有一定的抗炎作用。顾欣等试用2，4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）引起小鼠肌损伤以使血清磷酸肌酸激酶（SCPK）升高，同时肌肉磷酸肌酸激酶（MCPK）下降，另用豚鼠肌浆免疫建立的大鼠过敏性肌炎模型发现：灵芝孢子粉对此模型有纠正作用。此外，灵芝孢子粉对小鼠迟发型超敏性皮肤炎症亦有抑制作用，提示灵芝孢子粉对肌肉损伤和炎症确有保护作用。
　　1.11清除自由基作用
　　灵芝孢子粉水提取物可抑制小鼠肌肉匀浆的自发性脂质过氧化、Fe2+/半胱胺酸引起的脂质过氧化，使丙二醛(MDA)生成量减少，并能使黄嘌呤氧化酶/黄嘌呤系统中超氧阴离子生成，说明灵芝孢子粉中某些成分可能有捕获超氧阴离子的作用。此外，还可明显提高小鼠肝胞浆中过氧化酶活性，加速活性氧自由基反应中生成的过氧化氢的水解。但灵芝孢子粉对超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性无明显影响。这说明灵芝孢子粉对2，4-二氯苯氧乙酸所致的小鼠肌损伤的保护作用可能与作为活性氧自由基的捕获剂，清除超氧阴离子等自由基有关[22]。
　　1.12其他作用
　　曾广翘等[23]探讨全破壁灵芝孢子治疗法对男性更年期综合征的疗效。通过对138例诊断为男性更年期综合征病人分组，其中80例作全破壁灵芝孢子胶囊治疗并对其临床症状，血睾酮、SOD、MDA 水平及主观抑郁症状评分作观察，并与58 例病情相同的病人予安慰剂对照。结果显示，治疗组的病人症状改善率为74. 3 %，血睾酮水平3周前后分别为(131. 51±19. 12) mg·L-1与(253. 78±21. 45) mg·L-1，SOD水平3周前后分别为
　　(1 068.3±121. 4) U·g-1·Hb与(1178. 1±132. 6) U· g-1·Hb，MDA 水平3周前后分别为(7. 6±0. 8)μmol· L-1与(5. 8±0. 6)μmol· L-1。抑郁症状评分各指标均有较大改善。表明全破壁灵芝孢子胶囊是治疗男性更年期综合征的一种有效、安全的方法。
　　2展望
　　近年来，随着科学技术进一步发展，关于灵芝孢子的化学成分和药理作用的各方面研究已展开，研究较多的是灵芝孢子三萜类化合物和多糖。但是总体来看，研究还不够深入，这主要与灵芝孢子的产量、采集方法、破壁技术及提取技术等方面技术不够成熟稳定有关。因此，灵芝栽培、孢子采集储存等环节应该采取标准化控制，同时仍需进一步分离、纯化、鉴定有较强药理活性的成分，以为进一步通过模拟、化学合成等途径合成新的药物提供基础数据和可靠依据。