核心论文发表电刺激犬肝脏对心电活动及肝组织的影响

　　生物电现象在生命活动中是一种基本属性，在每个机体的生命活动中都会伴随产生这种现象。脉冲电场引发的生物学效应与一般的其他的静电场有所不同，它的脉冲具有上升沿时间很短，以及作用持续时间短等特点。正是由于脉冲电场的这些特点，它能够在一段比较短的时间内产生一个更加显著的生物学效应。因此，电磁场现今被广泛应用于了临床[1]。

　　摘要：目的 探讨长期脉冲电刺激肝脏局部对心电活动的影响;长期脉冲电刺激肝脏对肝功能及肝组织学的影响。方法 重庆黄犬1条，人工永久起搏器电极连接于肝脏右叶表面，关闭起搏器感知功能，起搏频率100次/min，起搏电压5V，作为长期脉冲电刺激器用。观察心电图3月。结果 ①脉冲电刺激肝脏心电图(ECG)未见明显改变。②脉冲电刺激肝脏未导致犬生活行为改变，肝功能正常。③电极连接处肝脏组织结缔组织轻度增生。结论 ①电压5V、频率100次/min、持续3月的脉冲电刺激犬肝脏对心电活动基本无影响。②电压5V、频率100次/min、持续3月的脉冲电刺激犬肝脏，电极连接处肝组织轻度结缔组织增生，其余肝组织无改变，肝功能检测正常。

　　关键词：核心论文发表,起搏器电极,心电变化,局部肝组织,肝功能,肝组织学

　　目前，脉冲电刺激在临床上广泛用于治疗多种疾病，如针灸治疗中的电针深刺次穴用来抑制膀胱的过度活动，;脉冲电刺激穴位对腹部术后尿潴留患者的有效防治[2];低频脉冲电刺激对失眠症患者的治疗[3];低频脉冲电刺激小脑顶核对脑梗死患者肢体功能恢复的治疗 [4];精神科的无抽搐电休克(MECT)治疗对难治性精神分裂症患者的治疗[5]等。但是每一种脉冲电刺激治疗必须控制其损害，以安全为前提。因此，电刺激肝脏的安全性及对心电活动的影响值得研究。

　　1资料与方法

　　1.1实验动物、仪器

　　1.1.1实验动物 健康1年重庆黄犬1条，雄性，体重9kg。饲养环境：室温(25±2)℃，湿度为(71±8)%，自由摄食及饮水。适应性喂养1月。

　　1.1.2实验器材 体内脉冲电刺激器：用人工永久心脏起搏器代替(美国美敦力)，植入体内后关闭感知功能，起搏频率100次/min，发出脉冲电刺激的电压5V，做为体内脉冲电刺激器使用。

　　心电监护仪(湖南瑞博)、超净工作台(上海泸新净化设备厂)、生物组织包埋机(泰维科技)、切片机(泰维科技)、恒温摊片烤片机(泰维科技)、普通光学显微镜(日本 olympus)、全自动生化分析仪(日本东芝)、半自动血凝检测仪(法国STAGO4型)。

　　1.1.3主要试剂及溶液配制 HE染色液(苏木素0.5g、纯酒精5ml、钾明矾10g、蒸馏水100ml、氯化汞0.25g、冰醋酸2ml)

　　1.2永久心脏起搏器肝脏植入 起搏器肝脏植入手术前抽静脉血送检肝功能、尿胆红素，检测起搏器工作状态良好。

　　犬固定于手术台，心电监护仪电极正极接于狗左上肢(前腿)，负极接于右上肢(前腿)，地线接右下肢(后腿)，心电监护仪电压定标1mV相当于 10mm，，心电监护仪心电扫描速度以25mm/s，连续监测记录II导联ECG信号走纸。持续静脉缓慢推注丙泊酚，使狗处于全麻状态。麻醉成功后，取犬的右上侧腹部进行逐层切开，止血，暴露肝脏。起搏器电极接于右肝叶表面并固定。检查无出血。后逐层缝合，电极于切口处引出。肝脏对应部位腹壁皮肤下做一荷包，将起搏器置入荷包，起搏器与电极固定，后逐层缝合荷包和皮肤。术后用青霉素肌注预防感染共3d。伤口局部换药，直至伤口痊愈。伤口未曾感染。

　　1.3观察内容及标本处理

　　1.3.1心电图 心电监护仪或/和体表12导联心电图。实验前、实验结束、实验过程中最少1次/w体表12导联心电图。实验前、实验结束、实验过程中每月分别一次心电监护仪持续观察心电图10h以上。具体记录指标如下。

　　心率(次/min)。测量10个R-R间隔，求其平均值，该数值为一个心动周期的时间(s数)，在计算60s内有多少个心动周期，即心率。

　　心律失常：轻度心律失常：包括窦性心律不齐、窦性心动过速、室上性早搏、室性早搏。

　　起搏心律：起搏器发放电脉冲刺激诱发的qRs波。

　　恶性心律失常：包括室性心动过速、心室颤动、室性逸搏、窦性停搏。

　　1.3.2生活行为改变 轻度行为异常：包括活动减少、进食减少。重度行为异常：包括活动明显减少、进食明显减少、衰竭、死亡。

　　1.3.3血液检查 常用肝功能生化指标。

　　1.3.4肝脏组织病理学光镜检查 起搏器肝脏植入术后3个月，逐层开腹，肉眼观察起搏器电极肝脏连接部位无脱落，观察整个肝脏与局部外观情况。取出起搏器及电极，体外验证起搏器起搏功能正常。肝脏局部组织取标本，切片，HE染色。缝合伤口。术后，犬手术切口愈合较好。

　　肝组织HE染色方法：①Harris苏木素染色7min;②自来水冲洗多余的染液;③1%盐酸酒精分化数秒，使细胞核呈紫色;④自来水中充分洗涤;⑤1%氨水中数秒，至返蓝;⑥自来水至蒸馏水中冲洗;⑦1%伊红染色，3min左右。

　　2结果

　　2.1脉冲电刺激肝脏可诱发轻度心律失常，见表1，图1。

　　2.1.1脉冲电刺激肝脏可诱发轻度心律失常，见图2。

　　手术前，狗的心电图提示为窦性心律，心率约136次/min，T波与主波方向一致;手术过程中(即麻醉状态下)，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于60～140次/min，T波双向;术后第2d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于78～150次/min，T波与主波方向一致;术后第 3d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于78～150次/min，T波与主波方向一致;术后第4d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于 95～200次/min，T波与主波方向一致;术后第5d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于100～200次/min，T波与主波方向一致;术后第6d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于136～200次/min，T波与主波方向一致，见图3。 　　术后1w，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于150～200次/min，T波与主波方向一致;术后第9d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于150～200次/min，T波与主波方向一致;术后第11d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于130～200次/min，T波与主波方向一致;术后第13d，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于130～200次/min，T波与主波方向一致;术后第3w，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于150～200次/min，T波与主波方向一致;术后第4w，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于150～200次/min，T 波与主波方向一致;术后第5w，犬的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于150～200次/min，T波与主波方向一致;术后2月，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于130～200次/min，T波与主波方向一致;术后3月，狗的心电图提示为窦性心律不齐，心率波动于130～200次 /min，T波与主波方向一致。

　　2.1.2脉冲电刺激肝脏未诱发起搏心律

　　2.1.3脉冲电刺激肝脏未诱发严重的心律失常

　　2.2 脉冲电刺激肝脏未导致犬生活行为改变 犬于术后第1d未进食及未活动，第2d进少许流质饮食及活动较少，此后犬的食欲及活动均正常。

　　2.3脉冲电刺激肝脏未发生犬肝功能损害，见表2。

　　实验前与实验结束时犬肝功能检测均未见异常。

　　2.4 肝脏组织病理学检查

　　2.4.1肉眼观察 脉冲电刺激肝脏局部，肝脏为深红色、质软、表面光滑、未见异常。脉冲电刺激肝脏后，刺激电极与肝脏连接局部肝组织少许结缔组织，余未见明显改变。

　　2.4.2(HE染色后)光镜观察，见图4。

　　3讨论

　　心脏起搏器植入技术目前在临床已广泛应用，一般采取的是静脉穿刺放置心内电极导线，起搏器参数调整，深吸气、咳嗽后位置不变，阈值不变，连接起搏器。应用至今未曾报道有肝脏损害者出现。本研究通过持续脉冲电刺激肝脏局部，结果发现：出现了轻度的心律失常，但肝脏的局部组织、肝功能无明显改变，同时肝组织亦无明显病理改变。

　　通过发放一定形式的电脉冲，使心脏受到刺激，而产生激动和收缩[6]，这是起搏器的工作原理。因此，人工心脏起搏要发挥作用，则心肌一定要具备兴奋、传导和收缩功能。当持续脉冲电刺激肝脏局部时，可能由于身体内组织将脉冲传导至心脏，该冲动与心脏的电活动发生融合，但由于该冲动在传导过程中逐渐减弱，故造成了轻度的心律失常现象。

　　综上所述，持续脉冲电刺激肝脏是安全的，因此，可以认为，安置心脏起搏器对肝脏是安全的，但是，本实验只观察了3个月，更长时间的刺激对肝脏是否有损害或持续脉冲电刺激其他脏器是否安全目前仍不清晰，需要进一步研究。

　　4结论

　　4.1电压5V、频率100次/min、持续3月的脉冲电刺激犬肝脏对心电活动基本无影响。

　　4.2电压5V、频率100次/min、持续3月的脉冲电刺激犬肝脏，电极连接处肝组织轻度结缔组织增生，其余肝组织无改变，肝功能检测正常。

　　参考文献：

　　[1]乐安，杨刚，吴江，等.脉冲电刺激对内皮细胞形态和功能的影响[J].生物医学工程学杂志，2008，25(3)：1.

　　[2]陈燕萍，郑培秋，何艳英，等.穴位脉冲电刺激预防腹部术后尿潴留的效果观察[J].现代中西医结合杂志，2009，17：2032.

　　[3]游菲，马朝阳，袁琨，等.低频脉冲电刺激治疗失眠症的临床研究[J].中华物理医学与康复杂志，2009，6：415-417.

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